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細胞培(pei)養方法:

1. 細(xi)菌污染 

細菌(jun)(jun)污(wu)染是實(shi)驗室細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養中常(chang)見(jian)的污(wu)染，即使在細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養液(ye)中加入了抗菌(jun)(jun)素，也可能(neng)因為操作不慎而引起(qi)污(wu)染。常(chang)見(jian)的有革蘭氏(shi)陽性菌(jun)(jun)，如(ru)枯草桿菌(jun)(jun)以及大腸桿菌(jun)(jun)、假(jia)單胞(bao)(bao)菌(jun)(jun)等革蘭氏(shi)陰(yin)性菌(jun)(jun)，其(qi)中又(you)以白色(se)葡萄球菌(jun)(jun)較(jiao)常(chang)見(jian)。 

培養細(xi)(xi)胞受細(xi)(xi)菌污(wu)染后(hou)，會出現培養液變混(hun)濁，pH改變。污(wu)染后(hou)細(xi)(xi)胞發生病理改變，胞內顆粒增多、增粗，圓(yuan)脫落死亡。 

2.真菌污染 

真(zhen)菌(jun)污染是細胞培養過程中常見的一(yi)種，常見的真(zhen)菌(jun)有(you)煙(yan)曲霉、黑曲菌(jun)、孔子霉、毛霉菌(jun)、白色念珠菌(jun)和酵母菌(jun)。 

培養細胞(bao)受(shou)真菌(jun)污染后，可見(jian)(jian)培養液(ye)中(zhong)漂(piao)浮(fu)著白色或(huo)淺黃色的小點(dian)，有的散在生長，培養液(ye)一般(ban)不發生混(hun)濁；倒置顯微鏡下可見(jian)(jian)絲狀(zhuang)、管狀(zhuang)或(huo)樹枝狀(zhuang)的菌(jun)絲縱橫交錯(cuo)在細胞(bao)之間或(huo)培養基(ji)中(zhong)，有的呈(cheng)鏈狀(zhuang)排列。 

真菌污染后，細胞(bao)生長變慢，但后由于(yu)營養耗盡及(ji)毒性作用而使細胞(bao)脫落(luo)死亡。 

3. 支原體污(wu)染(ran) 

支原(yuan)體(ti)是介于細(xi)菌與病毒(du)之(zhi)間能(neng)獨立(li)生活的微生物(wu)，小直徑0.2μm，一般過濾(lv)除(chu)菌無(wu)法去除(chu)它，光鏡(jing)下難以看清它的形(xing)態結構。開(kai)始不易發現，能(neng)在偏堿條件下生存，對有(you)抗(kang)藥性。多吸附于細(xi)胞表面或(huo)散在于細(xi)胞之(zhi)間。 

培養細胞(bao)受(shou)支(zhi)原體污染后，部分(fen)敏感細胞(bao)可見細胞(bao)生(sheng)長增殖變(bian)慢，部分(fen)細胞(bao)變(bian)圓，從瓶壁脫落(luo)。但(dan)多數細胞(bao)污染后無明顯變(bian)化，或略(lve)有變(bian)化，若不及時處理，還會產生(sheng)交叉污染。 

4. 病(bing)毒污染 

 組織細胞(bao)培養過(guo)程中，如果沒有除去潛(qian)在的(de)病毒(du)，就(jiu)會產生病毒(du)污染。目前，從原代猴腎細胞(bao)的(de)培養中已發現不少于20種(zhong)血清性病毒(du)。

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