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研域(上海)帶你了解血清保存應注意事項
發布時間: 2022-06-21 點擊次數: 1424次血清的保存應該(gai)注意以下幾點:
1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
2、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。
補體(ti)參與反應(ying)有:細(xi)(xi)(xi)胞(bao)毒作用, 平滑肌(ji)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)收縮, 肥大(da)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和(he)血小板(ban)釋放組胺, 增強吞噬作用, 促(cu)進淋巴(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和(he)巨噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)發生化(hua)學(xue)趨化(hua)和(he)活化(hua)。
3、瓶裝(zhuang)血清(qing)解凍(dong)需采用逐步解凍(dong)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫(wen)冰(bing)箱中的血清(qing)放入4℃冰(bing)箱中溶解1天。然(ran)后移入室溫(wen),待全部溶解后再(zai)分裝(zhuang)。
在溶解(jie)過(guo)程中需不斷輕輕搖晃(huang)均勻(小(xiao)心勿造成(cheng)氣泡),使溫度(du)與成(cheng)分均一,減(jian)少沉(chen)(chen)淀的發(fa)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解(jie)凍,這樣(yang)因溫度(du)改變太大,容易造成(cheng)蛋白質凝集而出(chu)現(xian)沉(chen)(chen)淀。
4、一般廠商提供的血清(qing)(qing)為(wei)無菌(jun),無需再過濾(lv)除菌(jun),如發現血清(qing)(qing)有懸浮物,則可將血清(qing)(qing)加入(ru)培(pei)養液內一起過濾(lv),切勿直接(jie)過濾(lv)血清(qing)(qing)。
5、血(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)沉淀物 絮狀(zhuang)物:主要是血(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)脂(zhi)蛋白(bai)變性及(ji)解凍后血(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)(zhong)纖維(wei)蛋白(bai)造成,這些絮狀(zhuang)物不會影響血(xue)清(qing)本身的(de)質量。可用離心(xin)3000rpm,5分鐘去(qu)除,也可不用處理。
顯(xian)(xian)微鏡下(xia)“小黑點":經過(guo)熱處理過(guo)的血清,沉淀(dian)物(wu)的形成會顯(xian)(xian)著增多。有些沉淀(dian)物(wu)在顯(xian)(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察象“小黑點",常誤(wu)認(ren)為(wei)血清受污(wu)染。
一般情(qing)況下,此小黑點不(bu)會影響(xiang)細胞生(sheng)長,但如果懷疑血清(qing)質(zhi)量,則應立即停止使用,更換(huan)另一批號(hao)的血清(qing)。
6、切勿將血清在(zai)37℃放置太久,否(fou)則血清會變得渾濁,同時(shi)血清中的有效(xiao)成分會破會而(er)影(ying)響血清質量。
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